(建议)制备死细菌!若需要死细菌作为对照,可将活细菌放入水浴锅中95℃加热5min,或58℃加热3h,具体操作根据样本类型自行选择,即可获得死细菌.死细菌的后续操作同活细菌!两份活细菌,一份不用PMA处理,一份用25μMPMA处理(处理不同类型或不同来源细菌的PMA浓度需查阅相关文献).将PMA处理的样本室温置于摇床上,避光孵育10min,使染料与样本充分混匀!将样品曝光,可以使用蓝色或白色光源,照射时间需自行摸索。
非LED灯(如卤素灯)可能会加热您的样本并对分析产生负面影响,照射时需要使用冰块对样品降温处理。样本可以在光解后冷冻保存!若在进行PMA处理光解之前冷冻样本可能会损坏细胞膜并产生假阴性结果。如需在检测之前冷冻样本,建议先进行预实验!PMA的部分作用机制是通过沉淀从样本中去除PMA共价修饰的DNA;因此,在提取基因组DNA时,需使用相同体积的基因组DNA洗脱液,进行体积归一化处理!阳性对照可以使用活细胞的基因组DNA!
注:DNA提取步骤参考所用试剂盒的说明书。PMA的部分作用机制是通过沉淀从样品中去除PMA结合的DNA;因此,在提取基因组DNA时,各组应使用相同体积的基因组DNA洗脱液,进行体积归一化处理(死菌和活菌提取基因组DNA量不一致,因此两者浓度相差明显).吸取10μL菌液于液体LB培养基,在细菌培养箱中培养过夜或更长时间,使细菌培养至对数生长期(OD600≈0);注:培养基类型及培养时间根据实验调整。取活细菌两份,每份400μL,置于干净离心管中!
染细胞叠氮溴化丙锭试剂
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(建议)制备死细菌!若需要死细菌作为对照,可将活细菌放入水浴锅中95℃加热5min,或58℃加热3h,具体操作根据样本类型自行选择,即可获得死细菌.死细菌的后续操作同活细菌。AnnexinV-PE偶联物YF488TUNEL细胞凋亡试剂盒(绿色荧光)YF488TUNEL细胞凋亡试剂盒(绿色荧光)YF555TUNEL细胞凋亡试剂盒(橙红色荧光)YF555TUNEL细胞凋亡试剂盒(橙红色荧光)YF594TUNEL细胞凋亡试剂盒(红色荧光)YF594TUNEL细胞凋亡试剂盒(红色荧光)Cy3TUNEL细胞凋亡试剂盒Cy3TUNEL细胞凋亡试剂盒BiotinTUNEL细胞凋亡试剂盒BiotinTUNEL细胞凋亡试剂盒SuperViewTM488Caspase-3活细胞分析试剂盒SuperViewTM488Caspase-3活细胞分析试剂盒Oxazoleyellow/PI膜透性凋亡检测试剂盒Oxazoleyellow/PI膜透性凋亡检测试剂盒JC-1线粒体膜电位检测试剂盒JC-1线粒体膜电位检测试剂盒LiveDeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒(CalceinAM,EthD-1)LiveDeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒(CalceinAM,EthD-1)LiveDeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒(CalceinAM,EthD-1)LiveDeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒(CalceinAM,PI)LiveDeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒(CalceinAM,PI)LiveDeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒(CalceinAM,PI)细菌活力/毒性检测试剂盒细菌活力/毒性检测试剂盒YF488Click-iTEdU成像试剂盒(绿色荧光)两份活细菌,一份不用PMA处理,一份用25μMPMA处理(处理不同类型或不同来源细菌的PMA浓度需查阅相关文献)!
该修饰过程会使DNA不溶,并使其在随后的基因组DNA提取过程中与细胞碎片一起丢失,进而阻碍死细胞中目标DNA的PCR扩增!残留在溶液中未结合的PMA,在强光照射下与水分子反应分解成无交联活性的羟胺化合物,使羟胺不再能够共价结合DNA,从而不影响PCR扩增!这个特性使得PMA可以通过实时定量PCR(qPCR)的手段,检测多种样本类型包括:细菌、生物膜、酵母、真菌、病毒和真核细胞;与qPCR、NGS、Sanger测序和LAMP技术相结合,广泛应用在食品和水安全和环境测试中!
我司主营生物诊断试剂领域的企业,主要以叠氮溴化丙锭为主要产品,公司位于上海市奉贤区金海公路3265号14幢11545室,更多产品信息详情请上http://www.xuankebio.com/查看。上海晅科生物科技有限公司愿与社会各界朋友共同合作、共创双赢、共创精彩明天!
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使用方法使用前注意事项PMA根据细胞膜通透性区分死菌和活菌.许多杀死细菌的方法,会导致细胞膜受损,因此适用于PMA检测。但有些方法,如紫外线照射,可能不会立即导致细胞膜破裂。因此,在选择PMA检测之前,需先进行文献检索和预实验确定是否适用于您选择的细菌类型和杀伤方法!PMA处理完细菌后需要进行光解,以使染料与死细胞DNA共价结合.光解操作可以使用蓝色或白色光源.一般来说,灯越亮,光解步骤的效率就越高!
在当今计算机广泛应用的环境下,医疗器械如果没有医疗软件帮忙是难以生存的。这些软件涉及到行业的各个阶段。越来越精密的软件在制药行业的销售、市场和管理信息系统中得到广泛的开发应用。还有一些为制药公司特殊需要定制的管理软件,可提供发货、存货控制、销售、购买管理、处理加工、信息管理系统以及清算功能。医疗软件不是对传统医药设备功能的重复,而是可为医药贸易和制造业提供强有力的支持,医药软件已经成为现代医药工业不可或缺的医药器械。