加样（样本处理区）将步骤1提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取5μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心！PCR扩增（核酸扩增区）1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；2设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL；荧光通道选择：检测通道（ReporterDye）FAM，淬灭通道（QuencherDye）NONE，ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光，选择None即可。3推荐循环参数设置：结果分析判定1结果分析条件设定（请参照各仪器使用说明书进行设置，以分析ABI7500仪器为例）反应结束后自动保存结果，根据分析后图像调节Baseline的Start值、End值以及Threshold值（用户可根据实际情况自行调整，Start值可设在3～1End值可设在5～20，使阈值线位于扩增曲线指数期，阴性质控品的扩增曲线平直或低于阈值线），点击Analyze自动获得分析结果。

　　B19病毒在人群中分布广泛，感染后的临床症状随宿主的免疫系统和血液状况的不同而不同，它主要引起儿童的传染性红斑和成年人的急性对称关节炎，也能引发胎儿死亡、胎儿水肿、胎儿先天性贫血！[1]本试剂盒适用于检测血液中的人细小病毒，用于人细小病毒感染的辅助诊断!【检验原理】本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，设计一对人细小病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对人细小病毒的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断！

　　B19病毒在人群中分布广泛，感染后的临床症状随宿主的免疫系统和血液状况的不同而不同，它主要引起儿童的传染性红斑和成年人的急性对称关节炎，也能引发胎儿死亡、胎儿水肿、胎儿先天性贫血！[1]本试剂盒适用于检测血液中的人细小病毒，用于人细小病毒感染的辅助诊断。【检验原理】本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，设计一对人细小病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对人细小病毒的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

　　2结果判断阳性：检测通道Ct值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；阴性：样本检测结果Ct值40或无Ct值！3质控标准阴性质控品：无特异性扩增曲线或无Ct值显示；阳性质控品：扩增曲线有明显指数增长期，且Ct值≤32；以上条件应同时满足，否则实验视为无效.检测方法的局限性样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段.

科研人细小病毒B19核酸检测试剂盒荧光PCR

　　【注意事项】所有操作严格按照说明书进行；试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；反应液应避光保存；反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理！肺炎支原体(MP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)人细小病毒B19（HPVB19）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)梅毒螺旋体（TP）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）EB病毒(EBV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)埃博拉病毒(EBOV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)甲型肝炎病毒(HA-V)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)肠道病毒EV71型(EV-71)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)心病毒(SAFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)人星状病毒(HastV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)柯萨奇病毒CA16型(CA-V-16)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)呼吸道合胞病毒A型（RSV-A）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)呼吸道合胞病毒B型（RSV-B）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)登革热病毒通用型(DFV-U)核酸检测试剂盒(荧光PCR法).

　　说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用【储存条件及有效期】-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次，有效期12个月.【适用仪器】ABI7500、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪！【标本采集】抽取全血5mL至EDTA-2Na抗凝管!【保存和运输】采集或处理好的样品在2℃~8℃条件下保存应不超过24h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过3次!