小鼠白细胞介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒检测范围:3pg/ml-120pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中白细胞介素-6(IL-6)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素-6(IL-6)水平。用纯化的小鼠白细胞介素-6(IL-6)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-6(IL-6),再与HRP标记的白细胞介素-6(IL-6)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-6(IL-6)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素-6(IL-6)浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。血清血浆的收集如下:1,促凝管(临床上用橘红色管头)待分层后取上清液保存2,自然凝固,取普通生化试管,自然凝固30分钟以上,然后离心取上清,离心转速为2000转每分,时间15分钟。全血收集完成后尽量分离出血红细胞,避免导致溶血对实验产生干扰其次涉及样本保存,因为不确定老师样本取样周期和实验周期到底有多长,这个过程涉及以下问题。1,如果取样周期比较久,而且每次样本不是很多,每天或者短时间都有样本出来,这个情况样本涉及到保存。保存条件是1周内实验的,2-8℃,一周以上一个月以内实验,-20℃保存,一月以上-80℃保存。2,关于样本检测问题,如果样本取样周期过程,涉及到分不同时间段来检测,那么试剂盒的批次也会出现差异,会有一定的变异系数。这个过程有2个建议,第-一,可以收集一定数量(满足一个试剂盒的量或者几个试剂盒的量)来进行一次实验。避免样本长时间保存(样本保存时间越长,蛋白降解风险越大),但缺点是会用到不同批次试剂盒,影响批间差。第二个就是把样本全部收集好了后,再一次进行实验,用同一批次试剂盒。这个可以减少批间差,但样本不同时间取样会导致前后样本数值之间会存在一定的差异性。这个还是要根据实际取样周期和取样量来做决定。
Copyright © 上海晅科生物科技有限公司