细胞换液：转染24小时后对细胞进行正常换液，悬浮细胞转染过程中不用换液。分析结果：质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率，48-96小时检测mRNA或蛋白表达.若进行稳定表达细胞株的筛选，则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选！siRNA转染后9小时荧光检测转染效率，48-72小时检测mRNA或蛋白表达！注意事项：质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水，但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer!

　　细胞转染简介：随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具!在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛！转染，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术!随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法!转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径!电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法，有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术！

　　理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点.病毒介导的转染技术，是目前转染效率较高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势！但是，病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及.其它物理和化学介导的转染方法，则各有其特点。需要指出的一点，无论采用哪种转染技术，要获得较优的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化.影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态，到转染方法的操作细节，都需要考虑。

　　使用说明：材料准备RNA浓度20uM/L质粒DNA浓度300ng-2ug/ul（注意：①溶解于无菌双蒸水或超纯水；②无内毒素）操作步骤提前1天接种细胞：细胞汇合度在60-80%左右，再进行转染!核酸复合物制备：将核酸与转染试剂按照1:1关系直接混合，用移液器吹吸10-15次混匀，室温静止10-15分钟。在细胞培养基中加入核酸复合物：根据参考用量在细胞中加入核酸复合物，并轻轻混匀；细胞培养基里面可以含有血清.

　　ZetaLife转染试剂可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞，如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等；可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞;用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中。突出表现：ZetaLife多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞；本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤，不易出现细胞变形，保持高的细胞活力；不激活细胞表面或细胞体内marker;可反映真实的细胞通路蛋白原始数据；可转染免疫细胞、悬浮细胞等.

　　转染24小时后进行正常换液，不能像Lipo2000一样转染4-6小时后换液。原代细胞、免疫细胞转染时，细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基！转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格：品牌：美国ZetaLife货号：AD6000250.25ml/1590元品牌：美国ZetaLife货号：AD6000500。5ml/2390元品牌：美国ZetaLife货号：AD6000750!

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