转染过程在转染前2h,换掉原有的培养基,更新为新鲜的完全培养基!制备DNA稀释液.向DNA稀释液中直接加入转染试剂,室温静置10~15min!转染复合物配制完成.将转染复合物加入细胞培养基中,轻柔混匀!继续培养24~48h,收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆!使用本产品转染后一般在24h开始进入表达高峰期,36~48h达到表达高峰。与市场领xian的PEI转染效率的对比:使用PEIPrime(PEI:DNA浓度比3:1)或某知ming品牌PEI,用CMV-SEAP质粒转染20ml含HEK293悬浮细胞的培养物.
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质粒的准备:在5%zui终培养体积的DMEM或培养基中,每106个细胞稀释0ugpDNA!PEI的准备:在5%zui终培养体积的DMEM或培养基中,每106个细胞稀释0ugPEIPrime,混匀通过快速,短暂涡旋或颠倒数次试管,将pDNA和PEIPrime溶液混合在一起。使pDNA和PEI的混合物在室温下静置10分钟.一边旋转板,一边将pDNA和PEI混合物逐渐滴加到细胞中!于37℃CO2培养箱中培养。
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关于转染试剂,作为一家主营产品为PEI线性转染试剂的厂家,北京百奥创新科技有限公司在其他生物制品这个行业中都享负盛名,在业界中也有一定的地位。
PEI是Polyethyleneimine的缩写。在pH中性溶液中具有极gao正电荷密度的合成聚合物!带正电的PEI与带负电的DNA牢固结合,并赋予净阳离子电荷,使DNA进入细胞。当下,PEI是流行的瞬时转染试剂HEK293和CHO悬浮培养液!而serochem旗下的PEIPrime™是一种高性能转染试剂,旨在实现高产量,可重复性,和可扩展的瞬时基因表达,且其是生产任何具有成本效益的生物制剂的很好选择,包括重组蛋白,抗体和病毒.
PEIPrime是基于PEI基础上的高性能转染试剂,是化学转染中的阳离子聚合物转染试剂;在HEK293和CHO细胞悬浮培养中具有性;制备简单,价格适中,适合大规模瞬时转染;比PEI所需时间较少.PEIPrime的设计着眼于在PEI的可扩展性基础上,进一步提高,这使其成为可以用于大规模瞬时基因表达的zui具成本效益的试剂!无论转染一毫升还是一百万升培养基,我们都会提供较优的性能,服务和价格!产品特点:转染效率高:对于DNA和RNA的转染,都适用,转染效率可以达到95%以上;应用范围广:既适合贴壁细胞,也适合悬浮细胞转染;既可以进行瞬时转染,也可以进行稳定转染。
不会.
这个肯定是WIN系统下的了,除非你是计算机专业的