转染过程在转染前2h,换掉原有的培养基,更新为新鲜的完全培养基!制备DNA稀释液!向DNA稀释液中直接加入转染试剂,室温静置10~15min!转染复合物配制完成。将转染复合物加入细胞培养基中,轻柔混匀!继续培养24~48h,收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆.使用本产品转染后一般在24h开始进入表达高峰期,36~48h达到表达高峰。与市场领xian的PEI转染效率的对比:使用PEIPrime(PEI:DNA浓度比3:1)或某知ming品牌PEI,用CMV-SEAP质粒转染20ml含HEK293悬浮细胞的培养物!
北京百奥创新科技有限公司在其他生物制品这个行业中,是一家屈指可数的好公司。其主营的产品——PEI线性转染试剂,更是在业界中受到广大客户的喜爱。
PEI是Polyethyleneimine的缩写.在pH中性溶液中具有极gao正电荷密度的合成聚合物!带正电的PEI与带负电的DNA牢固结合,并赋予净阳离子电荷,使DNA进入细胞!当下,PEI是流行的瞬时转染试剂HEK293和CHO悬浮培养液.而serochem旗下的PEIPrime™是一种高性能转染试剂,旨在实现高产量,可重复性,和可扩展的瞬时基因表达,且其是生产任何具有成本效益的生物制剂的很好选择,包括重组蛋白,抗体和病毒。
低毒性:对转染细胞的毒害作用小;操作简便:将粉末直接用蒸馏水配置溶液;性价比gao:相同规格,是竞品poly**的产品价格的1/3,适用于大规模的转染!北京百奥创新代理AdvancedBiomart在中国的业务!北京百奥创新科技有限公司:辐射五大服务方向:国内试剂耗材经销代理;国外试剂订购(直订或境外代理);基因组测序(二代、二代+三代);基因分型(SNP检测):低/中/高通量项目;生物样本运输;多家授权代理品牌,涉及30多种,经营代理500多个品牌:AdvancedBiomart、IntactGenomic、Sigma、Epigentek、ThermoFisher、DNAGenotek、USAScientific!
静海提供转染试剂经销商
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PEI带有正电荷,DNA带有负电荷,PEI与DNA牢固结合在一起,促进DNA进入细胞。AdvancedBiomart提供的线性PEI转染试剂是一种粉末状的高性能转染试剂,实现瞬时基因表达,从而实现高、可重复、可扩展的特性!应用范围:转染的细胞类型多,悬浮细胞和贴壁细胞也能转染,转染效率高,特别是在HEK293和CHO悬浮细胞中转染效率极gao.适用于包括抗体、病毒、重组蛋白等生物制剂的制备过程中。产品特点:毒性低、效能高易操作,性价比gao转染效果可重复、可扩展快速、高通量转染过程中普遍适用操作流程(以6孔板为例):细胞铺板:头天将细胞种植在六孔板中,以转染时细胞密度在70%~80%为宜!
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线性PEI转染试剂PEIPrimePowder,TransfectionGradeLinearPolyethylenimine是以一种阳离子高分子聚合物-聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)为载体的基因转染试剂。PEI是在pH中性溶液中具有极gao正电荷密度的合成聚合物.带正电的PEI与带负电的DNA牢固结合,并赋予净阳离子电荷,使DNA进入细胞。线性PEI转染试剂PEIPrimePowder,TransfectionGradeLinearPolyethylenimine是一种高性能转染试剂,利用PEI的特性旨在实现高产量,可重复性和可扩展的瞬时基因表达。
提高转染效率的话,可以适当降低转染时细胞的密度(我试过60~70%的密度比90%更好一些),另外还有可能就是细胞的生长状态,还有在接种后24h内进行转染。转染的效率根本上还是由细胞种类决定的,有些细胞系好转,效率高,有些就不怎么好了。但是我们还是可以尽可能的提高转染效率, 细胞生长状态要好,这个很重要。另外,每种细胞系都有自己的好用的转染试剂,要多看文献知道这种细胞系用哪种转染试剂*多。
然后自己可以按照DNA和转染试剂的比例做个曲线,看看reporter的表达效率,做到好的转染效率。其实DNA的质量也很重要,不仅仅是内毒素影响细胞的生存,一般情况下DNA超螺旋好比列越高越好。为了促进表达,转染前线性化也可以(可能是这样,没有这么做过)。如果有些细胞系确实难转,就应该考虑其他方法了,电穿,病毒之类的。amaxa的nucleofector可以直接把质粒打到核里,很好用。不客气,努力!。