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HCCLM3-LUC人肝癌细胞荧光素酶标记培养步骤_细胞HCCLM3-LUC

上海琛艺实业有限公司提供ATCC原代细胞,ATCC菌株代购,同时上海琛艺新增细胞库,具有自己的研发细胞培养库,上千株细胞具有STR鉴定,开春大放送,价格优惠,同时还有好礼相送,具体欢迎咨询我们销售人员。。。。LLC-luc小鼠肺癌细胞-荧光素|LLC-luc细胞【细胞传代】:1:3传代【细胞活力】:90%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)【细胞检测】:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌【细胞冻存】:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)【细胞运输】:干冰运输(1Vial)或活细胞运输(T-25flasks)详细背景:这株细胞的细胞骨架染色突出呈现肌动蛋白,在细胞质中有丰富的平行微丝。有报道称在1uM血管紧张素II存在下,它们会收缩。细胞在软琼脂中形成克隆,SV40大T抗原阳性。细胞来源:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外大学建系HCCLM3-LUC人肝癌细胞荧光素酶标记培养步骤2、消化培养法该方法是采用前述的消化分散法,将妨碍细胞生长的细胞间质(包括基质、纤维等)去除,使细胞分散形成细胞悬液,然后分瓶培养。3、悬浮细胞培养法对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直

人成纤维细胞生长因子(FGF)ELISA试剂盒_ELISA试剂盒

中文名称:人成纤维细胞生长因子(FGF)ELISA试剂盒英文名称:RatFolicacid,FAELISAkit本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体样本中大鼠叶酸(FA)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠叶酸(FA)水平。用纯化的大鼠叶酸(FA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠叶酸(FA),再与HRP标记的大鼠叶酸(FA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠叶酸(FA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠叶酸(FA)浓度。人成纤维细胞生长因子(FGF)ELISA试剂盒样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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