细胞储存在-196℃液氮中，理论上储存时间是无限的，但是液氮冻存步骤繁琐，需要经过程序降温，如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟，然后移至-20℃冰箱30分钟，再移至-80℃冰箱保存16-18个小时（或隔夜），然后才移至液氮罐中进行长期的储存.（其中需要注意的是-20℃条件下不可超过1个小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量的死亡！）赛尔瑞成为解决以上问题，开发出一款无血清、无DMSO、无毒性、非程序降温、-80℃可长期冷冻保存的冻存液体系：CRD0无血清无DMSO细胞冻存液（货号：CF0301）。

　　☆可原位冻存，比如杂交瘤细胞的亚克隆，可以大规模减少工作量，避免污染。赛尔瑞成科学家团队曾分别于2015年研发了“Cellregen无血清细胞冻存液”（货号：CF0101）和2020年研发了“无血清低DMSO细胞冻存液”（货号：CF0201；专利申请号：202010307890!6）！这两款冻存液均是不含血清，含DMSO，非程序降温、可-80℃长期冷冻保存的通用型细胞冻存液，区别在于“Cellregen无血清细胞冻存液”（货号：CF0101）的DMSO含量为10%，“无血清低DMSO细胞冻存液”（货号：CF0201）DMSO的含量为5%（与传统细胞冻存液的对比可参考附表），产品均获得了广大科研工作者的喜爱!

　　细胞冻存是细胞培养技术中细胞进行保种并长期保存的常用方法，其中细胞冻存液，作为细胞冻存时必须使用的一种溶液，不仅仅是说只是用来进行细胞的保存，在细胞的购买、寄赠、交换和运送过程中也起着关键作用，因此选择一款好的细胞冻存液就尤为重要！细胞冻存要取得好的效果，多采用血清、二甲基亚砜（DMSO）等作为保护剂，较大限度的保存细胞活力!这些物质有些能提高细胞膜对水的通透性，在缓慢冷冻过程中可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。

　　现有冻存方法存在的问题：DMSO对细胞存在一定的毒性，用量受到限制，降低或者不使用DMSO，寻找其它替代物是比较好的选择.血清，即使是纯化得到的白蛋白，由于其动物来源的特性，会增加带来病毒等感染物质的可能。而且，血清来源受限，价格昂贵，所以其使用也必然会受到越来越多的限制!因此，寻找替代血清的非渗透性保护剂也显得尤为必要。目前，成熟和稳定的冻存细胞技术是将加有保护剂的细胞悬液置于-196℃液氮中，这样可以使细胞暂时脱离生长状态而保持细胞的特性，在需要的时候经过复苏程序，使得细胞重新生长增殖以用于实验！

　　目前，成熟和稳定的冻存细胞技术是将加有保护剂的细胞悬液置于-196℃液氮中，这样可以使细胞暂时脱离生长状态而保持细胞的特性，在需要的时候经过复苏程序，使得细胞重新生长增殖以用于实验.细胞储存在-196℃液氮中，理论上储存时间是无限的，但是液氮冻存步骤繁琐，需要经过程序降温，如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟，然后移至-20℃冰箱30分钟，再移至-80℃冰箱保存16-18个小时（或隔夜），然后才移至液氮罐中进行长期的储存.

非程序降温无DMSO细胞冻存液操作方法

　　（其中需要注意的是-20℃条件下不可超过1个小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量的死亡.）赛尔瑞成科学家团队在细胞冻存领域进行了大量研究工作，分别于2015年研发了“Cellregen无血清细胞冻存液”（货号：CF0101）和2020年研发了“无血清低DMSO细胞冻存液”（货号：CF0201；专利申请号：202010307890!6）.这两款冻存液均是不含血清，含DMSO，非程序降温、可-80℃长期冷冻保存的通用型细胞冻存液，区别在于“Cellregen无血清细胞冻存液”（货号：CF0101）的DMSO含量为10%，“无血清低DMSO细胞冻存液”（货号：CF0201）DMSO的含量为5%（与传统细胞冻存液的对比可参考附表），产品均获得了广大科研工作者的喜爱。

　　同时，有些保护剂在细胞外也能减轻溶液中高浓度溶质对细胞的损伤，进一步避免细胞在冷冻和复苏过程中受到损伤！渗透性保护剂DMSO和非渗透性保护剂血清（主要含白蛋白）是使用广泛，效果稳定可靠的！此外，采用“慢冻快融”的方法能较好地保证细胞存活.标准冷冻速度开始为-1到-2℃/分钟，当温度低于-25℃时可加速，到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。复苏细胞采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤.