产品说明:产品名称AdvancedDNARNATransfectionReagent包装规格货号:AD600150规格:5ml储存条件常温运输,4℃保存,可保存两年,拒绝反复冻融!转染分类:化学类DEAE-葡聚糖法DEAE-葡聚糖是zui早应用哺乳动物细胞转染试剂之一,DEAE-葡聚糖是阳离子多聚物,它与带负电的核酸结合后接近细胞膜而被摄取,用DEAE-葡聚糖转染成功地应用于瞬时表达的研究,但用于稳定转染却不是十分可靠。
了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料!实验原理:外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法、脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞.但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大;病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响;所以现在对于很多普通细胞系,一般的瞬时转染方法多采用脂质体法!
转染(transfection)是细胞在一定条件下主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程!从本质上讲,和转化没有根本的区别.无论是转染还是转化,其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞,以提高细胞膜的通透性,从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部!所以在习惯上,人们往往也通称转染为广义的转化。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永yong久转染)两大类!简介:转染(transfection)是真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程!
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ZetaLife转染试剂可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞;用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中;转染细胞后可10小时内快速代谢的全球第三代新转染试剂!突出表现:ZetaLife多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;本转染试剂是通过细胞主动吞噬吸收进入细胞;本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤,不易出现细胞变形,保持高的细胞活力;不激活细胞表面或细胞体内marker;可反映真实的细胞通路蛋白原始数据;可转染免疫细胞、悬浮细胞等!
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原代细胞转染步骤
尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高!外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标记,如来氨丙基转移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸转移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系。转染技术的选择对转染结果影响也很大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等!细胞转染实验目的:学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法!
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1 会传染 孩子也可能传染2 不一定 复发高3 活检看情况 可以考虑4 就是割点肉 建议听从医嘱5 洁身自爱 可以试用伊可尔意见建议:建议去正规医院就诊。
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