案列介绍
Unique Autopure蛋白纯化系统 凝胶过滤色谱分离蛋白质
材料
色谱介质:Sephacryl S-200,蛋白质分离范围(5~250)×103
色谱柱:XK16/60预装柱
色谱设备:Unique Autopure25
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混合样品:含单克隆抗体,分子量180000;牛血清白蛋白(68000),上海宸乔生物科技有限公司,上海宸乔生物科技,溶菌酶(14000)
NaOH 0.5 mol/L
NaCl 200 mmol/L
PB 20 mmol/L
PH7.0 缓冲液
方法
1. 凝胶除菌处理:超纯水冲洗柱子后,用0.5mol/L NaOH 正向冲洗柱,流速 3mL/min,冲洗3 柱体积
2. 平衡: NaOH 处理完毕后,提供核酸分离纯化柱厂家,提供核酸分离纯化柱厂家,口碑好的,用超纯水冲洗 2 柱体积,接着用含 200mmol/LNaCl 和20mmol/L PB 的 7.0PH缓冲液冲洗 5~10倍柱体积
3. 上样:平衡完毕后,选择样品泵进行上样,上样流速3mL/min,上样体积为 1mL
4. 洗脱:上样结束后,用平衡缓冲液进行洗脱
5. 清洗与保存
纯化结束后,用 0.5mol/L NaOH 反向冲洗 2 柱体积,冲洗时间 30~60min,冲洗结束后,提供核酸分离纯化柱厂家,质量好商家,用超纯水正向冲洗 5
柱体积,再用 20%乙醇冲洗 3柱体积,然后拆下柱子,两端封死,低温保存
之后用含有0.5mol/L NaCL的溶液洗脱,冲洗 2~3柱体积,收集色谱峰· 耐压高,最高达30bar· 塑料薄膜保护玻璃柱管的设计更加耐用
· Locking ring能够保护柱床稳定性
FK是一种新型的耐压达到20Bar的 玻璃空柱,更加适合于新一代高流速填料如Capto™和MabSelect™系列
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