柱的平衡
20mmol/L 磷酸盐缓冲液,pH6.5,用 10柱体积平衡缓冲液平衡柱子,直至 pH及电导率监控显示与平衡缓冲液
的pH 及电导一致如果是连续梯度洗脱,可以适当增加柱的长度
案列介绍
Unique Autopure蛋白纯化系统 凝胶过滤色谱分离蛋白质
材料
色谱介质:Sephacryl S-200,蛋白质分离范围(5~250)×103
质量好核酸分离纯化柱商家_正规-上海宸乔生物科技有限公司
色谱柱:XK16/60预装柱
色谱设备:Unique Autopure25
混合样品:含单克隆抗体,分子量180000;牛血清白蛋白(68000),溶菌酶(14000)
NaOH 0.5 mol/L
NaCl 200 mmol/L
PB 20 mmol/L
PH7.0 缓冲液
方法
1. 凝胶除菌处理:超纯水冲洗柱子后,提供核酸分离纯化柱代理,专业报价,上海宸乔生物科技有限公司,上海宸乔生物科技,用0.5mol/L NaOH 正向冲洗柱,提供核酸分离纯化柱代理,口碑好的生产商,流速 3mL/min,冲洗3 柱体积
2. 平衡: NaOH 处理完毕后,用超纯水冲洗 2 柱体积,接着用含 200mmol/LNaCl 和20mmol/L PB 的 7.0PH缓冲液冲洗 5~10倍柱体积
3. 上样:平衡完毕后,选择样品泵进行上样,上样流速3mL/min,上样体积为 1mL
4. 洗脱:上样结束后,用平衡缓冲液进行洗脱
5. 清洗与保存
纯化结束后,提供核酸分离纯化柱代理,知名报价,用 0.5mol/L NaOH 反向冲洗 2 柱体积,冲洗时间 30~60min,冲洗结束后,用超纯水正向冲洗 5
柱体积,再用 20%乙醇冲洗 3柱体积,然后拆下柱子,两端封死,低温保存
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