试剂配制（试剂准备区）根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照；反应管数每满10份，多配制1份)，每测试反应体系配制如下表：将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中，21uL/管。加样（样本处理区）将步骤提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀短暂离心!PCR扩增（核酸扩增区）将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL；荧光通道选择检测通道（ReporterDye）FAM，淬灭通道（QuencherDye）NONE，ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光，选择None即可！

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　　汉坦病毒通用型（HTV-U）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）【产品名称】商品名称：汉坦病毒通用型（HTV-U）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)Name：Hanta-virusDetectionKit(Real-TimePCRMethod)【包装规格】50T/盒【预期用途】本试剂盒适用于检测病患血液、尿液及病变组织中的汉坦病毒RNA，适用于汉坦病毒感染的辅助诊断.【检验原理】本试剂盒对汉坦病毒基因组保守区设计特异性的引物和探针，用一步法荧光RT-PCR技术对汉坦病毒RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断.

　　 上海晅科生物科技有限公司晅科生物科技，我们巍峨耸立于上海市奉贤区金海公路3265号14幢11545室，我们在这里等待您的到来。 也可以通过电话联系： 联系方式:13671826025 联系人:华 致电我们，有意向不到的惊喜!

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　　【标本采集】抽取全血5mL至EDTA-2Na抗凝管，或采集患者尿液、病变组织.【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融!【使用方法】2核酸提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作！试剂配制（试剂准备区）根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照；反应管数每满10份，多配制1份)，每测试反应体系配制如下表：将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中，21uL/管.

　　2结果判断阳性：检测通道Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；可疑：检测通道35Ct值≤38，建议重复检测，如果检测通道仍为35Ct值≤38，且曲线有明显的增长曲线，判定为阳性，否则为阴性；阴性：样本检测结果Ct值38或无Ct值!质控标准阴性质控品：Ct38或无Ct值显示；阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且Ct值≤32；以上条件应同时满足，否则实验视为无效！【注意事项】所有操作严格按照说明书进行；试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；反应液应避光保存；反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理！

　　【生产企业】企业名称：上海晅科生物科技有限公司相关产品：登革热病毒通用型(DFV-U)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)登革热病毒2型(DFV-II)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)登革热病毒3型(DFV-III)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)尼帕病毒(NIPAH)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)亨德拉病毒(HeV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)新疆出血热病毒(XHFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)寨卡（zika）病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）黄热病毒（YFV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）布尼亚病毒（BV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）登革热病毒4型(DFV-IV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)登革热病毒1型(DFV-I)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)大肠杆菌通用型(EC-U)核酸扩增检测试剂盒(PCR-荧光探针法)汉坦病毒2型（HTV-2）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)汉坦病毒1型（HTV-1）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)核酸提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作！

　　推荐循环参数设置：结果分析判定结果分析条件设定设置Baseline和Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节)，以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果!检测方法的局限性样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段.