根据使用材料的不同进行下列操作:a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入0。8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解,然后把裂解液转移到5mL塑料离心管中!b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106悬浮细胞中加入0。8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解!然后把裂解液转移到5mL塑料离心管中!如果是fibroblasts或carcinoma细胞,0.
它具有下列特点:DNA更加纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在8-9之间!DNA产率一般在200ug/g左右(跟组织种类密切相关).可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应.操作更加简单,离心吸附操作代替离心沉淀,整个过程室温操作约10分钟,适合大规模样品处理。安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。质量和国外同类产品相当,但价格更便宜.常温运输和保存、有效期一年.注意:溶液A容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀!
加入0!4mL预热的溶液B到裂解液中.由于溶液B十分粘稠,可将1mL枪头剪掉一截再用,也可以用称量方法加0.4g.加入溶液B后需要颠倒数次充分混匀.65℃水浴5-10分钟!如果室温放置,DNA产量将降低10-20%.加入0。2mL自备氯仿,振荡器上充分振荡混均30秒,此时溶液将呈乳白色!一定要确保离心管底的液体被震荡起来!12000-15000g室温离心2分钟!上清透明,中间层为白膜(蛋白层)!小心将上清液平均转移到两个新的离心管中,避免触及中间的白膜.
肿瘤坏死因子α酶免试剂盒_TNF-α肿瘤坏死因子α_上海晅科生物科技有限公司
细菌DNA提取试剂盒说明书
动物DNA提取_植物DNA提取_上海晅科生物科技有限公司
动物DNA提取试剂盒(吸附柱法)本产品主要用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。它具有下列特点:DNA更加纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在8-9之间。DNA产率一般在200ug/g左右(跟组织种类密切相关).可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应.操作更加简单,离心吸附操作代替离心沉淀,整个过程室温操作约10分钟,适合大规模样品处理!安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
每个管中加入5倍体积的溶液C,充分颠倒混匀.分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液)!加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液.10。加0!3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液。