所用的缓冲液要保证蛋白质样品在其中不会变性或沉淀,PH 应选在样品较稳定、溶解性良好的范围之内,同时缓冲液中要含有一定的盐(NaCL),对蛋白质起稳定和保护作用
二、纯化后的蛋白收率较低怎么办?
调整样品 pH,使样品 pH与起始缓冲液 pH保持一致;
改变洗脱模式,如将线性梯度模式改变为阶段性梯度洗脱;
改变洗脱方法,如将pH 洗脱方法改为盐梯度洗脱方法;
改变洗脱强度洗脱过程中始终保持一定的操作压,流速不可过高,保持在 0.5~3.0mL/min即可
之后用含有0.5mol/L NaCL的溶液洗脱,冲洗 2~3柱体积,收集色谱峰
对于大多数纯化步骤来说,建议从开始的阶段使用强离子交换柱,可在摸索方法的过程中有一个宽的pH 范围
预处理和装柱
1. 将超纯水与沉降胶按1:3 比例悬浮,轻轻搅匀;
大孔树脂层析柱_哪里有层析柱相关-上海宸乔生物科技有限公司
2. 将色谱柱固定到设备支架上,链接出口管道,专业核酸分离纯化柱哪家好,报价,从柱底端进口反向泵入超纯水,排除管道及筛板中的气泡,停泵,
然后从出口端放出部分超纯水,保留1~2cm 高度超纯水,封死出口端,然后正向冲洗进口端管道和适配器,
排除筛板和管道中气泡;
3. 通过玻璃棒引流将悬浮胶导入色谱柱,在柱上端补充部分超纯水,搅匀,装上适配器;
4. 将柱出口端与色谱设备连接,专业核酸分离纯化柱哪家好,提供商家,以0.2MPa恒压装柱,装填至恒定的柱床高度,标记柱床胶面位置,关闭泵,上海宸乔生物科技有限公司,上海宸乔生物科技,松
开适配器,降低适配器至胶面下 2mm处,继续装填,专业核酸分离纯化柱哪家好,专业代理,待柱床高度稳定后,标记柱床胶面位置,降低适配器至
柱上标记柱床位置下2mm
专业核酸分离纯化柱哪家好更多知识