可用于CAR-T、干细胞培养；适合动物细胞培养、、重组蛋白和单克隆抗体的生产工艺开发完全模拟玻璃罐/生物反应器培养条件;搅拌式混合，多种专用搅拌桨(干细胞培养/CAR-T细胞培养）可选。可与玻璃罐/生物反应器共用控制器每个罐体可独立控制搅拌、PH、DO、液位（包括自定义级联控制）简单易装蠕动泵可调整蠕动泵精确控制补料量、实现批次、流加、连续及灌流培养模式"一次性生物反应器由外部支撑容器、生物反应袋、控制系统组成，规格有250L、500L、1000L和2000L，主要用于中试规模和生产规模非连续或连续过程中的微生物培养和细胞培养，可用于培养工艺开发时的临床样品制备和GMP生产细菌、细胞液的获得。它可以进行在线检测和工艺参数控制，例如：温度、pH、溶氧、通气及搅拌转速，同时一次性反应袋上带有安全便捷的取样装置，可以进行外部数据分析并进行比较，监控系统可以记录观察相关参数并在培养过程中进行工艺参数调整。相对于传统的不锈钢生物反应器，无需进行CIP及SIP，操作安全方便快捷。主要特点：1、外部支撑容器由不锈钢材料制成的圆柱形容器，用来固定及支撑生物反应袋。一次性袋子在里面安装，培养基和细胞注入一次性袋子，通过反应器控制系统监控和控制袋内的生长环境。容器开有观察窗，可以随时观察袋内细胞液情况，侧面下方留有各种电极安装口和取样口，方便电极的安装和取样，顶部带有搅拌发动机驱动器，传动轴和电机可分离，可反复利用，底部带有称重系统，主要用来测量反应器的重量。2、生物反应袋每一个袋子均经过伽马射线处理，材料完全没有动物来源成分，符合生物接触类制品USPVI级塑料标准，适合动物细胞培养和微生物培养。袋子包含硅胶管、无菌连接器、卡盘、过滤器、热电偶套管和搅拌，搅拌位于袋子的底部。3、控制系统可以进行温度、pH、溶氧、表层通气、深层通气及搅拌转速的精确控制"集成S.U.B.主要系统特点和优势：细胞培养容器，标准5:1调节比经典几何结构和设计预先配置为使用左侧或右侧选项以进行快速现场设置50L至250L体积可选，具有体积标示Delta-V控制系统针对哺乳动物细胞培养进行了优化集成Lauda温度控制装置，优化加热和冷却顶置式搅拌釜式反应器，BPC中预组装一次性搅拌组件直接机械耦合驱动优势和选择：交货时间4周或更短可选的电缆管理系统可单独集成每套系统都完成了工厂验收测试(FAT)可选择购买现场验收测试(SAT)适用于研发(RD)和工艺开发(PD)应用适用于cGMP生产

发酵过程或细胞培养过程中在线实时无菌取样；在线对发酵液中的营养成分、代谢产物进行全自动快速取样及分析检测；"工艺分析仪是PAT框架内不可或缺的工具、用于监测并控制关键的工艺参数。迪必尔可根据您的工艺需求，为您提供广泛的PAT组合，包括完全集成的传感器、生物工艺分析仪、以及自动化解决方案。""在培养过程中，营养物质和代谢产物的监测对整个过程的控制策略起着关键的作用。培养基中葡萄糖和乳酸的浓度可以反应出细胞的周期和细胞的生化状态。测量结果用于计算营养物质消耗率从而完全自动化的实时控制葡萄糖、硫酸铵等碳源的补料。产品特点1.可对各种生物反应器中发酵液自动无菌取样，2.取样探头为标准螺纹接口，适配各种不锈钢和玻璃发酵罐，3.通用4-20mA模拟信号输出，可以连接到本地自动化控制系统（例如DCS系统）4.可根据客户需求定制同时监控1-5个项目：葡萄糖、木糖、半乳糖、、甲醇、铵离子、谷氨酰胺、乳酸、谷氨酸、赖氨酸、钠、钙离子等可以随意组合5.完全自主研发，更低维护使用成本；6.在线取样系统可在位灭菌7.自动控制补料系统，实现恒浓度、阶梯浓度、分时段浓度培养过程分析技术"葡萄糖检测仪在线葡萄糖检测、全自动取样检测、闭环控制国产在线生化分析仪、在线监控葡萄糖甲醇发酵过程葡萄糖在线检测系统葡萄糖生物传感器"一、系统构成1.Quickflow自动取样系统取样器可对生物反应器中培养液进行自动在位无菌取样；取样系统可高温（125℃，45min）灭菌，系统可达到无菌控制要求用户自定义取样体积，(0.5ml-15ml)取样系统自带流加泵,可与检测系统通讯实现在线反馈控制,支持多种流加模式设定。流加泵带在线计量功能。可保证单批发酵在OD600大于100条件下稳定长时间取样；可设定取样频率和取样量，取样速度不低于2ml/min；取样探头接口或取样探头种类可适应5-2000L不同体积发酵罐；具有4℃样品保存功能，方便后续全面分析。具有反馈调节功能，可根据预设参数实现自动补料控制。2种取样探头，标准接口适用于机械搅拌式和玻璃反应器。根据客户需求，设计最合理的管路结构，完美连接样品和生化分析仪；2、控制系统通用模拟输出，可以连接到本地自动化控制系统（例如DCS系统）可以自主设定取样量、取样频率配套控制软件设置简单，可以图标或趋势图形显示数据，可提示用户进行相关维护操作，自动控制补料系统，实现恒浓度、阶梯浓度、分时段浓度培养智能学习功能，自动优化补料策略"

为工艺开发和扩大提供关键参数，尾气中O2、CO2百分比的批次记录–自动校准代谢数据–微生物和高密度细胞培养工艺的优化–允许采用先进的自动控制策略:启动收获、气体混合策略支持或添加补料和诱导培养基–通过将尾气分析值关联至关键工艺参数,确保工艺控制工具符合PAT理念德国Blue-In-One尾气分析仪是微生态体外模拟系统，可以长期在线检测分析发酵尾气中的CO2及O2浓度，并通过软件计算得到相关生物量参数，如CO2释放率CER、摄氧率OUR和呼吸商RQ等。通过在线检测尾气及参数计算，可以简便地判断发酵的各个阶段，对深入了解和掌握菌种的发酵规律，研究发酵工艺，合理调整通风及搅拌转速，特别是指导流程操作具有非常重要的意义。可广泛应用于各种发酵领域，尤其在基因工程、生物制药及采用流加工艺的发酵过程应用，能够大大加快新产品的研发及产业化，稳定生产，提高产率。BlueVary—免维护的多组合尾气分析仪满足您的需求BlueVary由一个和三个插入式安装的传感器套筒组成。一次可以测量两种不同的气体。第三个插入位置装有特殊的压力和湿度传感器套筒。气体传感器套筒可根据您的应用进行选择，并可根据需要随时更改。BlueVary提高您的效率一套设备来覆盖不同的测量任务⇒为您的应用选择合适的气体传感器套筒免维护⇒不需要年度维护，将停机时间降至最低自动补偿湿度和压力⇒不需要气体冷却器，泵或阀门可连接到任何软管或硬管⇒在您选择的发酵罐上使用它集成状态显示⇒一目了然地查看所有传感器和测量数据简化流程优化连续在线发酵监测：细胞培养、微生物、藻类，真菌或生物燃气生产过程识别代谢现象并获得重要的工艺参数适用于从实验室到工业规模技术简短事实3个传感器套筒插入位置1个用于压力/湿度2个用于两种不同的气体套筒可变连接和数据输出选项轻便但坚固的塑料外壳从现在开始可以提供CO2和O2（不同测量范围）的套筒CH4和H2的套筒即将推出易于安装BlueVary易于安装，因为它允许各种机械连接。如BlueSens其它传感器一样，BlueVary可以直接安装在排气管道或旁路中。我们提供各种软管喷嘴、快速连接件、卡盘和螺纹连接件。什么是新的！看看我们的BlueInOne和新的BlueVary传感器之间的简短比较：BlueInOneBlueVary外壳不锈钢聚碳酸树酯年度维护需要不需要测量的气体O2和CO2组合O2,CO2,H2,EtOH,CH4的各种组合灵活使用不同的组合的可能性没有有集成显示一目了然地查看测量结果和传感器数据没有有连接每个发酵罐的各种连接是是项目需要不同的测量范围重新校准（如果可能的话）选择另一个套筒单点校准以确保更高的精度是是可以与BlueVis软件结合使用以获得更高的自动化等级是是适合生物燃气应用不适合适合BlueVis软件结合BlueVis软件，BlueVary变成了一个更加强大的工具来监视和控制您的工艺。BlueVis软件记录和可视化数据并简化每月的单点校准。BlueVis软件通过BlueVary分析仪收集的数据和给定的工艺参数自动计算氧气吸收率（OUR），二氧化碳排放率（CER）和呼吸商（RQ）。该程序可用于同时管理多达12个工艺过程。微生物定向进化装置"–标准化集成至我们所有的发酵罐、生物反应器中–可实现湿度和压力的自动补偿–紧凑，可固定，节约空间–由一个感应器并行测量O2(计算OUR)、CO2(绝对浓度)可提供生物量生产、基质消耗以及产品形成速率数据-组装方便，根据空气进行快速、简便1-点式校准"

TJ细胞罐可用于动物细胞培养、重组蛋白和单克隆抗体的生产工艺开发–以批次、流加、连续或灌注模式进行工艺策略开发–对于生产规模的放大和缩小实验–小规模种子生产–细胞高密度发酵–贴壁细胞微载体培养–敏感有机体的低剪切力细胞培可平行控制6台罐体或多至12个罐体。适用于玻璃罐体、一次性罐体灵活更改不同体积的罐体，不需要对控制器进行额外的投资控制器模块化设计，可根据不同实验需求进行灵活配置每个罐体可独立控制搅拌、PH、DO、液位（包括自定义级联控制）简单易装蠕动泵可调整蠕动泵精确控制补料量、实现批次、流加、连续及灌流培养模式可扩展葡萄糖、乳酸、OD等参数在线检测、天平称重等功能模块TJ-Qtype过程控制软件提供先进的过程控制，支持DOETJ细胞罐细胞培养生物反应器可以根据培养和培养体系的不同采用不同的培养方式和搅拌桨。其独具特色的搅拌桨设计和先进流体动力学应用，使得CELLIGENPLUS解决了剪切力、通气对细胞伤害，为细胞生长提供了良好的生长环境，同时又可以满足细胞生长的各种物质营养的需求，有利于高密度、大规模细胞培养.生物反应器配备各种搅拌桨：1。篮式搅拌桨（BASKET）：气体交换在搅拌桨中间进行，与细胞不接触，采用美国NBS公司专用载片FibraDisk，其提供高生长面积/容积比，适用于分泌型产物的细胞培养或贴壁不紧细胞增殖，对CHO细胞密度可达109个/ml。2。CELL-LIFT搅拌桨：气体交换在搅拌中间进行，与细胞不接触。适用微载体培养，微载体量达到25g/L，并提供高效的微载体/液体分离器。3。SPIN-FILTER搅拌桨：桨筛网可以有效分离细胞进入桨内部，适用于悬浮细胞的连续培养。4。PITCHEDBLADE/MARINEBLADE搅拌桨：适用于对培养密度要求不高的实验性培养，适用于悬浮、微载体培养。

江南大学生物系统与生物加工过程研究室提供在线搅拌釜反应器放大计算、反应器在线放大计算、CFD流场模拟。数字孪生、数字双胞胎搅拌釜反应器放大设计、搅拌釜反应器计算流体力学模拟、反应器放大设计、液-固相搅拌釜反应器的放大研究、反应器在线放大计算、CFD流场模拟迪必尔生物提供免费的生物反应器放大scale-up和缩小scale-down模型在线计算网站，结合传质、CFD流场模拟、反应动力学基础理论研究。实现传质系数，剪切速率，二氧化碳分压，溶氧浓度，混合时间等关键工艺参数在不同规模生物反应器之间进行转换"多联小型平行发酵系统基础上，构建一个人工神经网络1和2，1的输入端为反应器全部的操作参数，如搅拌、气速、补料流量、发酵时间等，输出端为表征发酵效果的参数，如产量、浓度、转化率、发酵强度、能耗，等。发酵过程中，1实时对发酵过程进行学习，预测发酵效果。2使用1的一个实时副本，通过调整其输入值得到一个最优的操作条件组合，并反馈给反应器的控制系统。操作条件改变后的发酵数据再次进入1，如此循环往复，实现发酵工艺的自动优化。使用上述神经网络的一个实时副本（即虚拟发酵系统，或称数字孪生）和一套优化算法，计算最优操作条件并实时反馈给PLC进行测试。测试结果再次返回首个神经网络进行迭代优化。以上两步由软件控制、24小时不间断连续反复进行（即机器学习的过程）。不同培养基成分对发酵有着错综复杂的交互影响。这种影响很难用直白的机理模型来模拟，因为变化太多2、神经网络就是不考虑机理，但是做大量的实验，然后拟合出一个模型来，能表征这些相互影响3、如果用神经网络拟合了有限的实验数据之后，就可以任意调整培养基成分，然后从中找到最优的组合"1毕赤酵母表达系统1.1毕赤酵母表达系统概述毕赤酵母表达系统是近年来发展迅速的一个真核表达系统，对于异源表达有许多优点：①其分子遗传操作简单；②AOXI启动子具有很强的诱导启动特性，适合多种外源基因的高效表达；③重组毕赤酵母从摇瓶水平发酵扩大到细胞高密度发酵非常容易，外源基因的表达水平因此得到很大的提高，利于工业化生产；④外源蛋白的积累不会毒害酵母细胞；⑤毕赤酵母自身分泌蛋白少，简便纯化工艺；⑥外源基因重组在染色体实现一起复制和同步遗传，外源基因不易丢失。基于以上，毕赤酵母得以在高密度发酵发挥其巨大潜力。1.2常用表达菌株及表达载体1.2.1表达菌株目前，用于外源基因表达的P.pastoris菌株为Invitrogen公司构建，主要有：Y-11430、M-G100-3、GS115、KM71和SMD1168。其中Y-11430为野生型，其余皆为组氨酸突变型。GS115有完整的AOXⅠ基因，在甲醇培养基上表型为Mut+，当用重组表达载体转化后，因为表达载体线化所用酶不同，其转化子表型可能是Mut+或者Muts，可通过MD和MM培养基进行表型的鉴定；KM71的AOXⅠ基因被ARG4替代，虽然AOXⅠ和AOXⅡ有97%同源性，但AOXⅡ利用甲醇的能力远比AOXⅠ弱，在甲醇培养基上表现为Muts，其转化子也是Muts，表型不必鉴定。SMD1168为蛋白酶缺陷型菌株，特别适用于分泌表达载体，可避免表达外源蛋白被宿主菌同时表达的蛋白酶所降解。1.2.2表达载体P.pastoris没有稳定的附加体质粒，所以一般用整合型载体作为外源基因的表达载体。P.pastoris既有分泌表达型的，又有胞内表达型的，常用的表达载体主要：pPIC9、pPIC9K、pHILS、pAO815、pHIL-D2和pPICz等，其中pPIC9K和pHIL-S为分泌型表达载体，而pAO815、pHIL-D2和pPICz为胞内型表达载体。多数P.pastoris表达载体还含有HIS4基因，它可以作为转化体的选择标记，同时还含有在细菌中复制所必须的序列及一些选择标记，如大肠埃希氏菌的复制起始点和Amp抗性基因等；还有一些载体含有来自于AOXⅠ基因的3’端侧翼序列，可以用来指导含外源基因的组件插入3’AOXⅠ基因位点或者以基因整合的方式整合到酵母染色体的AOXⅠ位点。一般情况下，整合到酵母染色体上的基因拷贝数越多，蛋白表达量就越高。多拷贝发生在AOXⅠ或者组氨酸基因位点，但同一位点同时插入多个基因的几率仅占His+转化体的1%-10%，为此，人们根据不同表达载体的组成特点，如pPIC3K和pPIC9K含有kanr抗性基因；pPICz系列含有bler基因，利用基因剂量效应，分别依靠G418R或者ZeocinR的抗性水平来快速筛选除高拷贝的整合转化子。对于PAO815，一般通过多拷贝表达盒BamHI-BglII串联而先在体外用人工方法构建好多拷贝载体，然后转化到宿主菌中获得多拷贝转化子。

"葡萄糖:0.1~40g/L乳酸:0.05~5g/L甲醇:0.5~20g/L乙醇:1~40g/L测量频率高达每小时60个测量值，传感器的使用寿命为5000次或30天单个样品2.5分钟内能够获得所有测试结果；葡萄糖检测浓度不低于50g/L，测定误差≤±2%；谷氨酸、乳酸、赖氨酸检测浓度不低于5g/L，测定误差≤±2%；设备具备模拟量输出端口（4-20mA或0-5vDC），可与发酵控制上位机连接；"发酵过程中在线实时无菌取样；在线对发酵液中的营养成分、代谢产物进行全自动快速取样及分析检测；过程分析技术葡萄糖检测仪在线葡萄糖检测、全自动取样检测、闭环控制国产在线生化分析仪、在线监控葡萄糖甲醇发酵过程葡萄糖在线检测系统葡萄糖生物传感器为什么选这款产品？1.无任何延时，在线实时检测传统的检测方法无论采用DNS比色，菲林滴定或者高效液相色谱都需要花费大量的时间才能完成一次检测，一个样品往往需要三次左右的重复，一天能够进行的实验组数十分有限。并且化学方法具有灵敏度差，专一性不强的特点，容易给实验数据造成假阳性的后果导致实验重复性差。科技的创新和提升让检测人员从繁琐的样本分装、样本录入、结果记录等等工作中解放出来，提高效率，降低错误；采用葡萄糖生物传感器分析仪实时在线分析样品，不需要复杂的前处理过程就可对葡萄糖专一性识别。2.优化补料策略以金霉素为例；近年的研究发现，在生物系统中存在混沌现象，发酵初期的微小变化可能使发酵过程呈现出多态性和不稳定性。所以,通过控制前期适宜的菌体生长速率(即比生长速率μ=1/X·dX/dt)对整个发酵过程是至关重要的。若μ太小，将会使菌体生长缓慢，对数生长期过长，菌体不能良好生长，酶活力不强，产物产率低；若μ太大,菌体生长快,使代谢过于激烈，在中前期使氧耗过大以及因菌浓很高使发酵液粘稠导致氧传递能力下降,易产生溶氧降至临界氧浓度以下，影响菌体的正常代谢和产物形成，同时菌体活力过早减弱，也使金霉素效价偏低。因此优化培养基的成分,控制补料速率及其它有关工艺参数,是金霉素发酵过程的一个关键因素。利用葡萄糖生物传感器可以随时监测发酵液中糖浓度，为优化补料流加策略提供详实的数据支撑。3.精确控制发酵过程糖浓度的利器多年来已知当培养基中有葡萄糖存在时,微生物利用乳糖的能力即受抑制。葡萄糖能够干扰乳糖降解酶—一半乳糖苷酶的形成。这种“葡萄糖效应”不仅影响半乳糖苷酶,而且对细菌、酵母与霉菌中其它碳源的分解所涉及的分解代谢酶亦有普遍的影响，例如葡萄糖对盐霉素生物合成有严重的阻遏效应，利用葡萄糖生物传感器分析仪可以快速准确稳定的检测葡萄糖浓度，很好的控制抗生素代谢过程中的阻遏效应，提高单位效价。葡萄糖是发酵过程中菌体生长和产物合成的主要碳源，但必须控制其在发酵液中的浓度。在发酵前期，如果葡萄糖浓度过高（低），容易对菌体生长产生阻遏、抑制和限制作用;在发酵后期，如果葡萄糖浓度过低（高），则会限制菌体生长和产物合成。需特别注意的是流加的葡萄糖量，即使是超出最适浓度范围的微小波动都将引起严重的阻遏或限制。因此，能够及时准确的知道发酵过程中葡萄糖浓度，对提高产量、降低葡萄糖原料使用量、节省生产成本有着至关重要的作用。4.节约检测成本在线取样在线检测，无人工成本增加。且平均每个样品不到五分钱，价格便宜，不像多参数分析仪或液相需要色谱纯试剂或集合试剂包，价格高昂；无前处理，不需要专门的仪器。酶催化反应具有专一性，检验结果可以和液相色谱相媲美。生产过程半成品检测用葡萄糖生物传感器分析仪，提高产品合格率，成品检验用液相或者第三方，为公司节约检测费用和仪器投入。仪器全自动检测，容易操作，无需专业培训，可以实现现场检测无需质检人员取样到化验室检测，节省时间成本，人力成本，提高生产效率。检测原理：采用特殊设计的葡萄糖氧化酶膜电化学传感器对葡萄糖浓度进行检测。仪器自动采集样本并导入至测试区域。样本中所含的葡萄糖在固化的葡萄糖氧化酶的催化下发生酶解反应，反应产物为葡萄糖酸和过氧化氢。通过电极检测过氧化氢的含量从而计算出葡萄糖含量。仪器通过对已知浓度的标准品进行定标，标准品的电压值是衡量样本葡萄糖浓度的尺度。未知浓度可与标准品的电压信号相比较而获得。每次测定完毕后，系统缓冲液会自动清洗传感器电极，清洗完成后即可进行下一次测试。

TJ-MiniPod平行筛选发酵系统特别适合于各种微生物和基因工程菌的菌种筛选和培养的早期大批量工作，高通量筛选能力明显优于常规的摇床和生物反应器。传统的菌种初筛和复筛都是在没有任何检测参数的摇瓶或试管中进行的，筛选过程微生物的外在培养环境与工业发酵生产存在巨大反差，很多真正符合实际生产环境、性状优良的菌种往往在筛选初期就被漏筛掉了。TJ-minipod系列模块化迷你平行发酵系统解决了这个问题。可以通过该装置pH检测功能，根据发酵过程参数相关的原理观察到菌体生理特性的变化。带pH测量的平行筛选微型发酵罐既克服摇瓶中多参数测量的困难，又不失为代谢流分析的基本原理。微量补料技术，实现各种碳氮源的流加、pH控制或微量元素控制等。把pH实时测量与流加技术相结合，对实现以代谢流为核心的动态研究具有重要意义。用户可根据工艺需要,随意搭建模块化的高通量筛选平台，以最低的成本实现在线数据过程控制。菌体生长过程pH的变化规律，接种量与移种时机的研究基础培养基的优化菌体生长阶段和产素阶段最适pH的研究流加补料的研究，包括补料种类、速率及动力学研究可实现代谢流为核心的动态研究。全容量500ml/1L可选径高比1：2；装液系数60~80%罐体材质全硼硅玻璃，且做除静电处理罐盖结构全玻璃罐体、罐内无死角，带深层通气空气管和气体分布环表面处理内外表面镜面抛光，抛光精度Ra0.4；所有焊缝整齐美观不打磨（按照国际标准）pH控制系统控制范围：2.00-12.00；控制精度：±0.02温度控制15℃~40℃；精度±0.2℃通气控制范围：0.3~420mL/hr超微量补料控制范围：0.2ml~200ml/min；精度：±0.02ml搅拌控制50~800rpm2.3地衣芽孢杆菌的基因敲除地衣芽孢杆菌基因敲除的方法在我们过去的论文中有描述（Caietal.,2016）。在这里，以构建cydB缺陷菌株为例。简言之，以地衣芽孢杆菌WX‐02基因组DNA为模板，采用引物cydB‐KF1/R1和cydB‐KF2/R2扩增得到cydB基因的上游和下游同源臂，经重叠扩展(SOE)‐PCR得到融合片段。融合片段入到限制酶位点XbaI/SacI酶切后的T2(2)‐Ori中。菌落PCR和DNA测序证实重组质粒(T2‐cydB)构建成功。将重组质粒T2‐cydB电转化至WX‐02，通过菌落PCR和质粒抽提证实转化成功。阳性转化子首先在含20mg/L卡那霉素的LB培养基中，45℃条件下培养促进单交换发生，然后在无卡那霉素培养基中37℃培养。卡那霉素敏感菌落经菌落PCR验证，获得双交换转化株。这个突变株经DNA测序后证实，并命名为WXΔcydB。其他的基因（ythA,ctaC,qoxA,cydC,narG,nasC,resD）的敲除采用相同的方法。2.4基因表达载体的构建基因表达载体的额构建参照之前发表的方法(Caietal.,2016),我们以narG过表达载体的构建举例。简言之，采用引物分别扩增枯草芽孢杆菌P43启动子，编码呼吸型硝酸还原酶基因narG，淀粉酶终止子序列amyL，并用SOE-PCR将三个片段融合到一起。融合的片段插入至限制性内切酶EcoRI/XbaI切后的PHY300PLK。菌落PCR和DNA序列证实重组质粒(pHY-narG)构建成功。采用相同的方法构建了其他基因（vgB,purB,adK,nasC,andresD)）的表达载体。2.5地衣芽孢杆菌中基因整合为了构建同时过表达vgb,adK,和resD基因的菌株，按照之前发表的方法将P43启动子介导的单个基因整合到地衣芽孢杆菌的染色体中(Cai,Wang,etal.,2017).通过菌落PCR和DNA测序对重组菌株进行验证2.6测定细胞生物量，γ-PGA产量和葡萄糖细胞生物量通过细胞干重来测量。γ-PGA浓度通过高效液相色谱参照之前描述的方法完成(Wang,Yuan,Wei,Chen,Chen,2015).葡萄糖浓度通过SBA-40C生物分析仪测定（中科院，山东）。

TJ-DNAtp质粒培养生物反应器生物反应器/发酵罐提供更强功能和更多选择，满足工艺开发表征中的苛刻要求，适用于质粒DNA（PDNA)大规模生产、病毒载体生产、质粒表达、培养基优化、慢病毒制备、生产、悬浮细胞发酵法、采用贴壁细胞大规模生产慢病毒、采用悬浮培养生产慢病毒、重组大肠杆菌生产二倍体质粒的研究。采用质粒培养专用搅拌器、挡板、接种端口和环形分布器采用3片式搅拌器、微分布器、深层液面导管培养细胞以便顺利接种利用集成旋转过滤器进行连续培养，以便在灌注应用中截留细胞扩展配置Extendedconfiguration：多路补料、补料称重、ORP、甲（乙）醇含量在线检测、尾气O2/CO2在线检测、葡萄糖、菌体浓度在线检测MultipleFeeding、Weightingoffeeding、ORP、OnlinetestingofcontentforMethanolandEthanol、OnlinetestingofO2/CO2inExhaust、OnlinetestingofGlucoseandConcentrationofBacterial可平行控制6台罐体或多至12个罐体。适用于玻璃罐体、一次性罐体灵活更改不同体积的罐体，不需要对控制器进行额外的投资控制器模块化设计，可根据不同实验需求进行灵活配置每个罐体可独立控制搅拌、PH、DO、液位（包括自定义级联控制）简单易装蠕动泵可调整蠕动泵精确控制补料量、实现批次、流加、连续及灌流培养模式可扩展尾气分析、葡萄糖在线检测、天平等功能模块TJ-Qtype过程控制软件提供先进的过程控制，支持DOE传统发酵工艺优化需反复进行单因素或正交实验，效率低。传统自1956年谷氨酸的发酵成功，发酵技术一改盲目形式的经验继承产业，进入了从DNA分子水平控制微生物代谢的高速发展期，至今，现代生物技术尤其是合成生物学的飞速发展，使得人类对微生物进行定向育种、创造优秀杂合子及构建工程菌株成为现实。随着基因技术的进步，具有高附加值的生物制品大量涌现。为了提高目标产物的得率，经常通过基因敲除等技术改变微生物的代谢途径。人为改造后的菌株，其生理特性往往与出发菌株发生偏离，所以即便是将常用工程菌，用于生产新产品时，仍需进行操作长期考察、优化工艺条件的优化。传统上，发酵工艺优化一般是在实验室规模的生物反应器上，需通过反复进行单因素实验或者正交实验来完成的。这些实验方法无法准确描述各个参数之间复杂的、非线性的相互作用，得到的往往是局部极值。更糟糕的是，这种实验过程中每一个周期一般往往只是保持固定的操作条件，而非动态调整，仅在发酵结束后人工进行数据分析，效率十分低下。在以大数据和人工智能为代表的第四次工业到来之际，微生物发酵工艺优化所依赖的硬件和软件也处于一个升级换代的节点，正在从相对劳动密集型的研发转为高度自动化的模式。为了加快新产品进入市场的速度，有必要开发一种可以快速进行操作条件优化的设备和技术。近年来，多联小型平行发酵系统技术的兴起以及人工智能的普及，使得构建具有自动操作条件优化的平台成为可能。多联平行罐可以短时间内产生大量数据，配以强大机器学习算法进行实时分析和建模，可以在一次运行中同时进行多参数、多目标整体优化，大大提高发酵工艺优化的效率。此外，得益于机器学习算法的通用性，该平台无需任何软件上的改动即可用于不同微生物发酵的优化。目前利用平行生物反应器进行发酵工艺优化的较为成熟的做法是在发酵前和发酵结束后分别使用第三方软件进行实验设计和离线数据分析。例如，Eppendorf的平行生物反应器需要用到SAS公司的JMP软件，赛多利斯的微型反应器需要用到Umetrics公司的MODDE软件。利用人工智能进行发酵工艺优化虽然都有文献报道，但是没有成功实现商用的例子。主要原因是机器学习需要大量数据，传统的单个发酵罐产生的数据量不足以支撑。近年来兴起的高度自动化的平行生物反应器为实现智能发酵过程优化提供了硬件基础，但相关软件仍处于空白状态。迪必尔公司平行生物反应器系统可以协助客户构建智能优化平台，以机器学习算法进行实时分析和建模，可同时进行多参数、多目标整体优化，大大提高发酵工艺优化的效率，缩短新产品推向市场的时间。

单个或多个组合，用于微生物和细胞培养的台式生物反应器的黄金标准微生物发酵（细菌、酵母、真菌）悬浮液细胞培养（哺乳动物、植物、昆虫）利用微载体进行贴贴壁细胞培养培养基优化、克隆筛选小规模蛋白质表达、抗体表达工艺开发和工艺优化可平行控制6、12、24台罐体或多至320个罐体。适用于玻璃罐体、一次性罐体灵活更改不同体积的罐体，不需要对控制器进行额外的投资控制器模块化设计，可根据不同实验需求进行灵活配置每个罐体可独立控制搅拌、PH、DO、液位（包括自定义级联控制）简单易装蠕动泵可调整蠕动泵精确控制补料量、实现批次、流加、连续及灌流培养模式可扩展尾气分析、葡萄糖在线检测、天平等功能模块TJ过程控制软件提供先进的过程控制，支持DOE罐体为硼硅酸盐玻璃材质，带有不锈钢顶板，可根据各种需要进行配置。圆形底部设计便于在低搅动速率下取得最佳混合效果。采用Rushton搅拌器、挡板、接种端口和环形分布器培养微生物采用3片式搅拌器、微分布器、深层液面导管培养细胞以便顺利接种利用集成旋转过滤器进行连续培养，以便在灌注应用中截留细胞充气篮用于对剪切力敏感生物温和通气消泡塑料圆盘用于机械消泡，不需要使用消泡剂扩展配置Extendedconfiguration：多路补料、补料称重、ORP、甲（乙）醇含量在线检测、尾气O2/CO2在线检测、葡萄糖、菌体浓度在线检测MultipleFeeding、Weightingoffeeding、ORP、OnlinetestingofcontentforMethanolandEthanol、OnlinetestingofO2/CO2inExhaust、OnlinetestingofGlucoseandConcentrationofBacterial全容积3L/5L/10L灭菌方式离位灭菌通气策略Air+O2混合通气策略(微生物型))Air/O2/N2/CO2四种通气策略可选(细胞型)罐体材质硼硅酸玻璃+不锈钢顶盖(SUS316L)搅拌方式机械搅拌/磁力搅拌控制参数温度、转速、pH、DO、消泡、补料、空气流量扩展配置多路补料、补料称重、ORP、甲（乙）醇含量在线检测、尾气O/CO在线检测、葡萄糖、菌体浓度在线检测、罐压烯二炔类天然产物具有独特的分子结构和超强的的生物活性，是最具开发前景的一类抗肿瘤抗生素。烯二炔类抗肿瘤抗生素的生物活性主要依赖于其诱导的DNA损伤机制，即通过电子重排形成暂时性苯环双自由基，对DNA小沟进行亲核攻击后形成以脱氧核糖核酸碳链为中心的自由基，并在分子氧的作用下引起单链或双链DNA的断裂。作为迄今为止发现的细胞毒性最强的一类分子，烯二炔类天然产物可作为抗肿瘤抗体偶联药物（ADC）的弹头分子，具有极高的成药前景。目前发现的13种烯二炔分子中，NCS、CAL和ozogamicin已被开发成为临床药物，其中由日本开发的SMANCS（聚苯乙烯马来酸共轭NCS）主要用于治疗肝癌，而美国辉瑞公司最近开发的ADC药物Mylotarg（CD33单克隆抗体偶联CAL）和Besponsa（CD22抗体inotuzumab偶联ozogamicin）则分别用于治疗急性骨髓性白血病和成人复发或难治性B细胞前体急性淋性白血病。天赐霉素-A（Tiancimycin-A，英文简字TNM-A）是2016年通过基因组挖掘技术从链霉菌Streptomycessp.CB03234的发酵产物中分离发现的一种新型十元环烯二炔抗肿瘤抗生素，对多种恶性肿瘤细胞有超高的活性，超过目前临床一线化疗药物丝裂霉素近千倍，并且表现出更快速和更完整的肿瘤细胞杀伤力，将是抗肿瘤ADC药物理想的弹头药物分子。由于TNM-A在原始菌株Streptomycessp.CB03234中的产量极低，而目前达到工业化制备水平的其它烯二炔类天然产物的产量均在20mg/L以上，现有分子的来源远远不能满足临床研究和工业化生产的应用需求。此外，TNM-A因其复杂独特的分子结构，无法通过传统的化学合成方法来获取，通过微生物发酵是目前制备TNM-A最切实可行的手段。因此，构建稳定的TNM-A高产菌株，可以大幅提高其产量从而有效地解决现阶段TNM-A的发展瓶颈，从而加速推动TNM-A后继的抗癌活性分析、作用机理等临床前期研究以及抗肿瘤ADC新药的开发。

TJ-MiniBox迷你平行生物反应器是国产首台问世的微小型平行生物反应器，多达36个发酵罐平行（并行）控制，已经获得国家多项目专利证书。从2012年推出首代开始目前已升级至第四代，已经在国内安装了几百台，是市场上技术可靠的平行生物反应器系统，也是目前国内市场上工作体积最小的搅拌式生物反应器。适合于：发酵工艺平行优化微生物发酵（细菌、酵母、真菌）悬浮液细胞培养（哺乳动物、植物、昆虫）利用微载体进行贴贴壁细胞培养工艺开发和工艺优化用于工艺放大和缩小实验（scaleup/down）TJ-MiniBox是一款四联一组，自动化的平行生物反应系统，非简单罐数堆叠。是真正的模块化设计，可平行控制4、8、12、16或更多台罐体。Mini4罐体平行反应器系统，可扩增8个、12个或更多台罐体，最高可扩展32个罐体，可适用于玻璃或一次性使用罐体进行平行控制。多种体积可选:250ml、500ml、1000ml、2l外观紧凑可选用多种搅拌桨型：平叶桨、螺旋桨、斜叶桨等，平均每个罐体只点用7cm的间距桌面空间顶部驱动搅拌控制，创新的无水温度控制系统，无需冷水辅助设备即可对每个罐体进行独立温度控制新颖的无水操作尾气冷凝器，拆卸简便，一键即可激活/停止控制器模块化设计，可根据不同实验需求进行灵活配置MiniBox控制模块PID控制可控多达32套组成的平行反应器网络精确独立控制pH、DO、转速、温度、微量补料速率、等发酵参数（包括自定义级联控制）可调速蠕动泵精确控制补料量，实现批次、流加、连续及灌流培养可选Gasmix气体混合工作站，Air、O2、CO2、N24路气体比例混合通气，可实现表层和深层通气每套最多可配置8个变速泵，8个调速泵可额外提供8个数字信号输出、4个模拟信号输入、4个模拟信号输出可支持扩展配置：氧化还原反应和浊度测定、排气测定O2│CO2、Biomass生物量在线监测等支持DOE功能及小型反应体系的软件系统国内首家将微小型平行生物反应器成功商业化的研发和制造商微生物/细胞高通量筛选迷你平行发酵罐、高通量迷你发酵系统、酶转化平行反应器、光照平行生物反应器、玻璃台式发酵罐全自动在线取样仪PAT生物过程分析软件、葡萄糖/乳酸/乙醇在线分析仪、在线甲醇电极、CO2/O2尾气分析仪、Biomass生物量在线检测实验室不锈钢生物反应器、中试不锈钢生物反应器、工程项目、胰酶消化器、灭活罐、肠道微生态体外模拟恒化器波浪式细胞生物反应器磁力搅拌配液工作站、配液系统