加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5!显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟!10！终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）！1测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）.测定应在加终止液后15分钟以内进行!上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司！

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　　人成纤维细胞生长因子(FGF)ELISA试剂盒ELISA是酶联接免疫吸附剂测定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术!此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。原理ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

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　　由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法（图a）、用于检测抗原的双抗体夹心法（图b）以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等！比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法！操作步骤方法一用于检测未知抗原的双抗体夹心法:包被：用0。

　　37℃孵育0。5～1小时，洗涤！加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0。1ml，37℃10～30分钟.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0!05ml.牛血清白蛋白（BSA）0！1克加洗涤缓冲液至100ml或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10％使用！上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司.公司酶科品牌ELISA试剂盒研发的种属涵盖：人，大鼠，小鼠，猪，牛，羊，兔，植物，农残类，鱼类等！

　　05MPH牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml.在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜!次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟!（简称洗涤，下同）。加样：加一定稀释的待检样品0!1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时！然后洗涤.（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）！加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0！1ml。