37℃孵育0！5～1小时，洗涤。加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0！1ml，37℃10～30分钟。终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0！05ml。牛血清白蛋白（BSA）0。1克加洗涤缓冲液至100ml或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10％使用！上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司！公司酶科品牌ELISA试剂盒研发的种属涵盖：人，大鼠，小鼠，猪，牛，羊，兔，植物，农残类，鱼类等.

　　仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）.仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心!胸腹水、脑脊液参照实行!细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集.离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH2-4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右.通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份！

　　若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融!不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性!操作步骤：标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第第二孔中分别加标准品100μl，然后在第第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第第六孔中，再在第第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第第六孔中各取50μl分别加到第第八孔中，再在第第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第第八孔中分别取50μl加到第第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉!

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