>T&J细胞罐可用于动物细胞培养、重组蛋白和单克隆抗体的

生产工艺开发

– 以批次、流加、连续或灌注模式

进行工艺策略开发

– 对于生产规模的放大和缩小实验

– 小规模种子生产

– 细胞高密度发酵

– 贴壁细胞微载体培养

– 敏感有机体的低剪切力细胞培>可平行控制6 台罐体或多至12个罐体。适用于玻璃罐体、一次性罐体

>灵活更改不同体积的罐体，不需要对控制器进行额外的投资

>控制器模块化设计，可根据不同实验需求进行灵活配置

>每个罐体可独立控制搅拌、PH、DO、液位（包括自定义级联控制）

>简单易装蠕动泵

>可调整蠕动泵精确控制补料量、实现批次、流加、连续及灌流培养模式

>可扩展葡萄糖、乳酸、OD等参数在线检测、天平称重等功能模块

>T&J-Qtype  过程控制软件提供先进的过程控制，支持DOE

T&J细胞罐细胞培养生物反应器可以根据培养和培养体系的不同采用不同的培养方式和搅拌桨。其独具特色的搅拌桨设计和先进流体动力学应用，使得CELLIGEN PLUS解决了剪切力、通气对细胞伤害，为细胞生长提供了良好的生长环境，同时又可以满足细胞生长的各种物质营养的需求，有利于高密度、大规模细胞培养.生物反应器配备各种搅拌桨：

    1。篮式搅拌桨（BASKET）：气体交换在搅拌桨中间进行，与细胞不接触，采用美国NBS公司专用载片Fibra Disk，其提供高生长面积/容积比，适用于分泌型产物的细胞培养或贴壁不紧细胞增殖，对CHO细胞密度可达109个/ml。

    2。CELL-LIFT搅拌桨：气体交换在搅拌中间进行，与细胞不接触。适用微载体培养，微载体量达到25g/L，并提供高效的微载体/液体分离器。

    3。SPIN-FILTER搅拌桨：桨筛网可以有效分离细胞进入桨内部，适用于悬浮细胞的连续培养。

    4。PITCHED BLADE / MARINE BLADE搅拌桨：适用于对培养密度要求不高的实验性培养，适用于悬浮、微载体培养。

影响毕赤酵母高密度发酵的因素

1.4.2.1 培养基

培养基是细胞进行高密度发酵的一个基本发酵条件，其组成对细胞的生长和外源基因诱导表达的影响最为直接。现在的培养基一般采用Invitrogen公司建议的如BMGY/BMMY和BSM，其中BMGY/BMMY 和培养基中含有磷酸盐缓冲液，可以维持在一定pH范围内，适合pH敏感度较高的外源蛋白的分泌表达。无机盐培养基BSM较便宜，一般配合使用PTM1微量元素溶液用于发酵罐水平的发酵。利用BSM进行发酵，有的外源蛋白能高效表达，有的则表达量少，甚至有的外源蛋白在 BSM 培养下根本不表达。所以可以通过优化BSM来提高目的蛋白产量。由于PTM1微量元素溶液成分较为复杂，必须过滤除菌，在发酵液中易生成沉淀，对大规模发酵造成很大影响，有研究人员发现可以用酵母提取物或者麦芽汁来替代PTM1，迪必尔生物工程（上海）有限公司,迪必尔生物工程,即简化工艺又降低成本，适用于工业化生产。

1.4.2.2 诱导期培养 pH

培养基的初始pH值对发酵过程中菌体生长水平、污染杂菌及表达蛋白的降解都有很大影响。不同的重组工程菌，有不同的最适生长和诱导pH值。P.pastoris在pH为3.0~7.0下均可正常生长，但当p H低于2.0时菌体便不能正常生长，甚至会阻碍生长，最适菌体生长的pH范围为4.8~5.5。发酵过程中需要根据目标蛋白进行相应调整，在甲醇诱导阶段采用的p H需要能保持目标蛋白活性。

发酵培养基的pH对P.pastoris的细胞繁殖和外源蛋白合成的影响主要表现在下面几个问题上：当p H值不适合以至抑制细胞中某些酶在代谢过程中的活性时，对正常的细胞代谢通路造成阻碍；影响P.pastoris细胞膜的通透性，华东理工细胞培养发酵罐怎么样,Sartorius其他制药设备，阻碍细胞吸收培养基的必需营养物进行生长和排出代谢物到细胞外部；影响P.pastoris细胞利用中间代谢产物；菌体的代谢过程往往会因pH值不同而发生改变，使目标蛋白的产量发生改变。

因此，虽然P.pastoris的生长pH范围较宽，但也必须根据表达的外源蛋白不同选择尽量合适的pH值，尤其是在诱导外源蛋白表达阶段。

1.4.2.3 诱导期培养温度

温度也是利用毕赤酵母系统表达外源蛋白中一个重要影响，温度从多个方面影响菌体的生长和发酵。温度对毕赤酵母诱导生产目标蛋白的活性、培养基的发酵特质（氧传递等）及合成途径等方面有很大影响。

升高温度，从酶的动力学而言可以加快生长代谢使发酵周期缩短。但温度一旦超过一定值又会使酶失活速度加快，而且菌体容易衰老，最终降低外源蛋白的表达量。有研究表明，华东理工细胞培养发酵罐怎么样,Applikon其他制药设备装置，低温诱导有利于表达外源蛋白，主要原因是：较低的诱导温度能降低发酵时的菌体死亡率，并能有效降低胞外蛋白酶的合成。也有研究指出，温度也可能影响重组外源蛋白肽链的正确折叠，由于以较低温度培养时毕赤酵母细胞的生长速率降低，蛋白质的合成也收到阻碍，使得毕赤酵母表达系统得到充足的时间完成翻译后加工修饰和外源蛋白肽链的正确折叠。因此，不论对改善菌体生长还是对提高蛋白的表达水平来说，选择最适的培养温度都是相当重要的。

溶氧控制

高密度发酵过程中，用发酵罐进行培养，外源蛋白表达量比摇瓶发酵可提高近百倍，主要原因是利用普通摇瓶进行发酵的通气量太小，溶解氧水平低，培养基中氧气传递速率慢，华东理工细胞培养发酵罐怎么样,biostar A其他制药设备发酵罐，因此对重组菌的高密度生长及外源蛋白表达有较为大的影响。

毕赤酵母具有好氧偏爱性，利用毕赤酵母进行高密度发酵需要消耗大量的氧气，而且供氧在甲醇诱导阶段是一个重要的限制性因子。如果没有足够的氧气供给，不仅抑制细胞呼吸，限制细胞增殖，而且会积累如甲醇，甲醛和过氧化氢的毒性代谢物，从而减少靶蛋白的表达水平。因此，必须供氧充足，一般控制溶氧在30%以上，但是溶氧也不能太高，溶氧>60%，氧气会对毕赤酵母细胞产生毒害。在毕赤酵母高密度发酵诱导阶段后期保持一个合适的溶氧水平，是提高发酵产量的重要因素。